核酸檢測(cè)的物質(zhì)是病毒的核酸。核酸檢測(cè)是查找患者的呼吸道標(biāo)本、血液或糞便中是否存在外來入侵的病毒的核酸，來確定是否被新冠病毒感染。因此一旦檢測(cè)為核酸“陽性”，即可證明患者體內(nèi)有病毒存在[1]。

新冠病毒感染人體之后，首先會(huì)在呼吸道系統(tǒng)中進(jìn)行繁殖，因此可以通過檢測(cè)痰液、鼻咽拭子中的病毒核酸判斷人體是否感染病毒。[2]所以說，核酸檢測(cè)陽性可以作為新型冠狀病毒感染確診的金標(biāo)準(zhǔn)。[1]

中文名
核酸檢測(cè)法
快速
導(dǎo)航
新型冠狀病毒核酸檢測(cè)原理

新型冠狀病毒的核酸檢測(cè)流程

核酸檢測(cè)的“假陽性”與“假陰性”
核酸檢測(cè)原理
所有生物除朊病毒外都含有核酸，核酸包括脫氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），新型冠狀病毒是一種僅含有RNA的病毒，病毒中特異性RNA序列是區(qū)分該病毒與其它病原體的標(biāo)志物。新型冠狀病毒出現(xiàn)后，我國科學(xué)家在極短的時(shí)間里完成了對(duì)新型冠狀病毒全基因組序列的解析，并通過與其它物種的基因組序列對(duì)比，發(fā)現(xiàn)了新型冠狀病毒中的特異核酸序列。臨床實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中，如果能在患者樣本中檢測(cè)到新型冠狀病毒的特異核酸序列，應(yīng)提示該患者可能被新型冠狀病毒感染。[3]
新型冠狀病毒核酸檢測(cè)原理
檢測(cè)新型冠狀病毒特異序列的方法最常見的是熒光定量PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）。因PCR反應(yīng)模板僅為DNA，因此在進(jìn)行PCR反應(yīng)前，應(yīng)將新型冠狀病毒核酸（RNA）逆轉(zhuǎn)錄為DNA。在PCR反應(yīng)體系中，包含一對(duì)特異性引物以及一個(gè)Taqman探針，該探針為一段特異性寡核苷酸序列，兩端分別標(biāo)記了報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；如反應(yīng)體系存在靶序列，PCR反應(yīng)時(shí)探針與模板結(jié)合，DNA聚合酶沿模板利用酶的外切酶活性將探針酶切降解，報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離，發(fā)出熒光。每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子產(chǎn)生。熒光定量PCR儀能夠監(jiān)測(cè)出熒光到達(dá)預(yù)先設(shè)定閾值的循環(huán)數(shù)（Ct值）與病毒核酸濃度有關(guān)，病毒核酸濃度越高， Ct值越小。不同生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品會(huì)依據(jù)自身產(chǎn)品的性能確定本產(chǎn)品的陽性判斷值。[3]
新型冠狀病毒的核酸檢測(cè)流程
對(duì)于新型冠狀病毒的核酸檢測(cè)，首先根據(jù)試劑盒說明書”樣本要求“部分進(jìn)行樣本采集，常規(guī)的樣本類型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等。
獲得患者樣本后，需盡快進(jìn)行檢測(cè)，如無法立即檢測(cè)需要轉(zhuǎn)運(yùn)的樣本，應(yīng)按照說明書的要求進(jìn)行低溫封裝，并送到專門的檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)機(jī)構(gòu)收到樣本后，對(duì)樣本進(jìn)行核酸提取，核酸提取試劑應(yīng)使用批準(zhǔn)產(chǎn)品說明書中指定的核酸提取試劑盒。
病毒RNA需要首先逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再進(jìn)行擴(kuò)增檢測(cè)。PCR擴(kuò)增和檢測(cè)應(yīng)使用批準(zhǔn)產(chǎn)品說明書中指定的熒光定量PCR儀，通過熒光定量PCR所得到的樣本Ct值的大小，可以判斷患者樣本中是否含有新型冠狀病毒。
上述過程中樣本的采集、保存、轉(zhuǎn)運(yùn)，樣本核酸的提取和檢測(cè)、結(jié)果的判讀均須嚴(yán)格按照試劑盒說明書要求進(jìn)行。[3]
核酸檢測(cè)的“假陽性”與“假陰性”
核酸檢測(cè)的“假陽性”是指患者本來沒感染新冠病毒，但核酸檢測(cè)出現(xiàn)陽性結(jié)果。此“假陽性”的出現(xiàn)通常是由于實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)過程中標(biāo)本間的交叉污染或?qū)嶒?yàn)室核酸污染造成的。在技術(shù)層面上講，只要實(shí)驗(yàn)室嚴(yán)格落實(shí)質(zhì)控工作，可有效避免“假陽性”的產(chǎn)生。