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串聯(lián)質譜法檢測動物源性食品中β-受體激動劑類藥物殘留

2019.4.12
實驗材料

動物源性食品

儀器、耗材

TSQ Quantum三重四極桿串聯(lián)質譜儀電噴霧電離源Surveyor AS自動進樣器

β-受體激動劑,又稱為β-興奮劑(β-agonists)是一類人工合成藥物,主要用于防治人、獸支氣管哮喘和支氣管痙攣,在藥學上稱為β-腎上腺素興奮劑。

β-受體激動劑在體育比賽中可用于增強運動員、動物(如馬)肌肉,提高運動成績,國際奧委會將β-受體激動劑列為禁用藥物。β-受體激動劑根據(jù)苯環(huán)取代基結構分為苯胺型(如:克倫特羅,俗稱:瘦肉精)、苯酚型(沙丁胺醇)、間苯二酚型(如:特布他林)。



80年代,國內外研究表明,在飼料中添加β-受體激動劑具有營養(yǎng)再分配作用,可以明顯提高瘦肉率。1992年,西班牙首次發(fā)生物多人食用含β-受體激動劑的畜產(chǎn)品中毒事件;1997年,香港發(fā)生進食大陸供港豬的內臟引起人中毒等事件。

隨著中國加入WTO后,國外對于中國出口的食品提出更高的要求,最近我國因獸藥殘留問題出口歐盟肉制品受阻;普通大眾也需要無公害食品。

因此,對β-受體激動劑的分析研究不僅在臨床藥物代謝動力學上、體育運動中,而且在食品安全方面都有重要意義。目前,對β-受體激動劑的分析方法有高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜-質譜法(LC/MS)、酶聯(lián)免疫法(ELISA)、氣相色譜-質譜法(GC/MS)等。



1. 酶解



準確稱取經(jīng)均質化的動物源性樣品2 g (精確到0.01 g)于50 mL 離心管中,加入0.2 mol/L乙酸銨溶液(pH5.2)10 mL,然后加入β-鹽酸葡萄糖醛苷酶/.芳基硫酸酯酶 40 μL,渦旋混勻3 min,于37 ℃下水浴避光振蕩16 h。



2.提取


樣品酶解后放置至室溫,渦旋混勻3 min,高速離心10 min(10000 rpm),取出上清液于另一50 mL 離心管中,加入1 mol/L高氯酸溶液1 mL,渦旋混勻, 高速離心10min后,轉移上清液至另一50mL離心管內。



3.凈化



用MCX固相萃取柱進行SPE凈化。用甲醇5 mL活化固相萃取柱后,上樣,抽干,然后用5 %氨水甲醇溶液5 mL洗脫。洗脫液在40 ℃下 N2吹干,以20%乙腈水溶液1.0 mL溶解殘渣,過0.45 μm濾膜,供LC/MS/MS法測定。




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