不看不知道，原來 C18 柱有這么多選擇技巧
分析不同的樣品時需要采用不同的柱子，而柱子的選擇卻難倒了不少“英雄漢”：
有時候樣品在這根柱子上分不開，換一根也分不開，再換一根還是分不開
有時候發(fā)現(xiàn)兩根 C18 柱子上的分離結(jié)果有著天壤之別
有時候使用速度更快的柱子，卻又不太習(xí)慣
C18 柱，也叫 ODS 柱，是分析工作中使用最多，應(yīng)用最廣的液相色譜柱，占據(jù)了液相色譜柱的半壁江山。正如世界上沒有兩片完全相同的樹葉，也沒有兩款一模一樣的 C18 柱，如何在市場上繁雜的 C18 柱中尋找到適合自己分析的那款，是一個值得深入探討的話題。
今天，整理了各種 C18 柱的異同，并幫助分析工作者在日常工作中更好地選擇合適的色譜柱。
液相色譜柱分類 — C18
液相色譜柱根據(jù)極性分為正相柱和反相柱。
正相柱大多以硅膠為柱，或是在硅膠表面鍵合-CN,-NH3等官能團的鍵合相硅膠柱；反相柱填料主要以硅膠為基質(zhì)，在其表面鍵合非極性的十八烷基官能團（ODS）稱為C18柱，其它常用的反相柱還C8,C4,C2和苯基柱等。
液相色譜柱的使用 — C18
1、適用pH范圍
反相柱優(yōu)點是固定相穩(wěn)定，應(yīng)用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料，使用時一定要注意流動相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動相的PH值小于2時，會導(dǎo)致鍵合相的水解；當PH值大于7時硅膠易溶解；經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。pH過高或過低還可能會損害密封圈和柱塞桿以及色譜柱更 嚴重的是當PH大于9.5時會破壞流通池的石英玻璃如果發(fā)現(xiàn)上述情況，色譜柱入口會發(fā)生塌陷。
2、樣品的前處理
a.最好使用流動相溶解樣品；
b.使用針頭過濾器（0.45um濾膜）出去樣品的可見異物。
3、流動相配制
a.流動相對樣品具有一定的溶解能力，并且保證樣品不會在色譜柱內(nèi)析出或長時間留在色譜柱內(nèi)；
b.流動相不與樣品發(fā)生反應(yīng)；
c.流動相粘度盡量小，使樣品得到高效分離的同時降低柱壓，延長色譜柱壽命；
d.流動相沸點不能太低，避免有氣泡產(chǎn)生，影響實驗進行；
e.流動相要保證現(xiàn)配現(xiàn)用，不能儲存太久，避免流動相生成雜質(zhì)微生物影響檢測；
f.流動相使用前先脫氣。
液相色譜柱的表征 — C18
雖然我們講的是 C18 的不同，但其實 C18，C18H37 這個基團都是一樣的，不一樣的是除了 C18 以外的其它各種因素。
硅膠顆粒 — 孔徑和比表面
孔徑的大小和比表面是相互影響的，又會進一步影響碳載量，再進一步影響保留、分離、載樣量以及穩(wěn)定性。
鍵合相
碳載量
測試得到的碳載量是包括了填料中所有碳的百分比，但僅僅 C18 鍵合相上的碳才是最有意義的碳，所以鍵合相密度更能有助于比較不同載體填料的 C18 的量。對同類型的填料而言，大多數(shù)化合物在高碳載量柱子上保留因子大于低碳載量的柱子，但堿性化合物這樣強極性的化合物除外。
封端與修飾
封端有著諸多的好處，但也有一些壞處，因此各大色譜柱公司推出色譜柱的封端的程度，都是對各種情況的一種平衡。極性修飾的 C18 能夠引入更多的作用力幫助分離，而不封端的 C18，是否也能看成某種極性修飾？
硅膠類型 — 封端對保留與峰型的影響
硅膠類型與封端與否的兩兩組合。封端的B類硅膠峰型最好，不封端的A類硅膠有著最強保留。
一般大粒徑填料因為壓力低，耐臟，用來做半制備或者制備，而小粒徑填料，一方面允許采用更短的柱子來達成所需的柱效，另一方面更能抵抗因為高流速而帶來的柱效下降，適合于做高效分析。小的粒徑，配合更小柱外體積，以及能夠耐受更高壓力的儀器，越能夠發(fā)揮其優(yōu)勢。
粒徑的優(yōu)劣勢對比
各種粒徑的硅膠都有著對應(yīng)的優(yōu)缺點，需要結(jié)合自身的實際情況才能更好發(fā)揮各種顆粒的優(yōu)勢。而其中 5μm、3.5μm 的全多孔顆粒（TPP），以及 2-3μm 的表面多孔型顆粒（SPP），有著最高的綜合總分。
