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當前位置: 安捷倫 聚合酶
品牌:安捷倫 貨期:訂貨 產(chǎn)地:美國

SP6 RNA 聚合酶是一種 DNA 依賴性 RNA 聚合酶,對 SP6 啟動子序列有高度的序列特異性。SP6 RNA 聚合酶從 5’ 到 3’ 方向合成 RNA 并結(jié)合 35S、32P 與?33P 核苷酸。這種酶是從高產(chǎn)重組大腸桿菌克隆中分離出來的。SP6 RNA 聚合酶的 SDS 聚丙烯酰胺凝膠電泳分析可確保純度達到 99%。單位定義:37 °C 下 60 分鐘內(nèi),催化 1 nmol 核苷三磷酸摻入形成酸不溶性物質(zhì)所需的酶量定義為 1 個單位。反應(yīng)條件:40 mmol/L Tris-HCl (pH 8.0),8 mmol/L MgCl2,50 mmol/L NaCl,2 mmol/L 亞精胺,30 mmol/L DTT,每種 rNTP 400 μmol/L,1 μg DNA 模板和 20 個單位的酶,體積共 25 μL。37 ℃ 下溫育 60 分鐘。

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噬菌體 T3 和 T7 RNA 聚合酶是 DNA 依賴性 RNA 聚合酶,對 T3 或 T7 啟動子序列具有高度的序列特異性。T3 和 T7 RNA 聚合酶均可從 5’ 到 3’ 方向合成 RNA 并能結(jié)合 35S、32P 與 33P 核苷酸。這些酶是從高產(chǎn)重組大腸桿菌克隆中分離出來的。

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選擇 Klenow Fill-In 試劑盒執(zhí)行部分補平反應(yīng),從而執(zhí)行 5’ 突出末端的完整補平以生成平末端并進行直接連接?;蛘?,利用試劑盒通過 [α32P]dNTP 對 5’ 突出末端進行放射性末端標記。Klenow Fill-in 試劑盒包含 Klenow 片段 (125 U)、dNTP(各 10 mM 儲備液)、Klenow 反應(yīng)緩沖液、可用作對照的預(yù)消化 DNA 以及用于 25 個反應(yīng)的充足材料。

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Paq5000 能夠快速而穩(wěn)定地擴增長達 6 kb 的基因組 DNA 靶標。延伸速率縮短為 30 秒/kb 且產(chǎn)率穩(wěn)定,Paq5000 是可以輕松用于多種基于 Taq 的方法中的 Taq 替代品。Paq5000 包括 ArchaeMaxx 因子,通過消除 dUTP 毒化作用提高產(chǎn)物的產(chǎn)量,dUTP 毒化作用通過 dCTP 脫氨作用在 PCR 期間積累 dUTP 引起。如果 DNA 中摻入了 dU,就會抑制酶以及 ArchaeMaxx 因子作為 dUTP 酶的作用,將有毒的 dUTP 轉(zhuǎn)化為無害的 dUMP 和無機焦磷酸鹽。

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SureStart Taq DNA 聚合酶是一種熱啟動 Taq DNA 聚合酶。SureStart Taq 可以并入事先經(jīng) Taq DNA 聚合酶優(yōu)化的 PCR 方案,基本無需修改循環(huán)參數(shù)或反應(yīng)條件。

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Taq2000 DNA 聚合酶是一種高度純化的重組 Taq DNA 聚合酶,克隆自嗜熱真細菌 — 水生棲熱菌。

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TaqPlus Precision 聚合酶混合物是 Stratagene 克隆的 Pfu DNA 聚合酶和 Taq2000 DNA 聚合酶(Taq DNA 聚合酶的高度純化重組形式)的優(yōu)化混合物。TaqPlus Precision PCR 系統(tǒng)展示出利用 DNA 聚合酶混合物所實現(xiàn)的最高復(fù)制準確度。熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶為特定 PCR 應(yīng)用提供明顯優(yōu)勢。Pfu DNA 聚合酶對分析的任意熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶表現(xiàn)出最低錯誤率。這種校正酶的特征還在于聚合速率相對較慢,產(chǎn)生高產(chǎn)量 PCR 產(chǎn)物所需延伸時間較長(即約 2 分鐘/kb DNA 靶標)。Taq DNA 聚合酶顯示出比 Pfu DNA 聚合酶高五倍的聚合速率,延伸時間通常較短(即約 1 分鐘/kb DNA 靶標),可產(chǎn)生長度為 5 kb 的高產(chǎn)量 PCR 產(chǎn)物。Taq DNA 聚合酶比 Pfu DNA 聚合酶的錯誤率高得多。然而,Taq2000 DNA 聚合酶優(yōu)于其他市售 Taq DNA 聚合酶,該重組形式的 Taq DNA 聚合酶需要延長時間較長的 PCR 擴增反應(yīng),以最大程度減少非目標擴增拖尾效應(yīng)。DNA 聚合酶混合物由非校正 DNA 聚合酶和校正 DNA 聚合酶組成,通常用于擴增較長的 DNA 靶標,產(chǎn)生比單獨使用 DNA 聚合酶產(chǎn)量更高的 PCR 產(chǎn)物。安捷倫為 PCR 設(shè)計了兩種 Taq 和 Pfu DNA 聚合酶的混合物:TaqPlus Long PCR 系統(tǒng)和 TaqPlus Precision PCR 系統(tǒng)。TaqPlus Long PCR 系統(tǒng)通常產(chǎn)生產(chǎn)量最高的 PCR 產(chǎn)物,可用于擴增極難擴增或較長的靶標(高達 35 kb)。TaqPlus Precision PCR 系統(tǒng)使用較短的 PCR 延伸時間產(chǎn)生產(chǎn)量相對較高的 PCR 產(chǎn)物,而錯誤率明顯低于 TaqPlus Long PCR 系統(tǒng)。此外,TaqPlus Precision PCR 系統(tǒng)可成功擴增長達 15 kb 的質(zhì)粒和 Lambda DNA 模板、長達 10 kb 的單拷貝基因組 DNA 模板以及使用單酶制劑難以擴增的模板。

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安捷倫的 Pfu DNA 聚合酶系列包括 Pfu DNA 聚合酶,一種從<>激烈火球菌<>分離的有校正作用的 DNA 聚合酶。該產(chǎn)品組合還以重組 Exo-Pfu DNA 聚合酶(克隆的 Pfu DNA 聚合酶的基因工程突變體)和 PfuTurbo DNA 聚合酶連同可選性替代去垢劑為特色。

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Agilent PfuTurbo Cx 熱啟動 DNA 聚合酶由一種 Pfu DNA 聚合酶的突變體制成,可完全克服尿嘧啶停滯,從而允許聚合酶讀取位于模板鏈中或摻入正在延伸的鏈中的尿嘧啶位點。由于讀取尿嘧啶位點可能會引入突變影響保真度,我們改造了突變聚合酶來提高校正活性,從而將錯誤率降低到原始 PfuTurbo DNA 聚合酶的錯誤率水平。 PfuTurbo Cx 熱啟動 DNA 聚合酶提高了高保真度 PCR 的整體可靠性,表現(xiàn)出更強的性能,以 5–10 kb 長度的序列為模板可獲得更高的產(chǎn)量,也可以用于更困難的系統(tǒng)(包括富含 GC 的目標序列),同時不影響準確性。盡管大多數(shù)系統(tǒng)不需要添加劑就能成功擴增,通常用 DMSO 來進一步提高長鏈、高復(fù)雜性或富含 GC 的目標序列的產(chǎn)量。

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PfuTurbo DNA 聚合酶是克隆 Pfu DNA 聚合酶和專利 ArchaeMaxx 聚合酶增強因子的特殊配方產(chǎn)品,研究證明,它能提高長達 19 kb 目標片段的 PCR 產(chǎn)量,且不會影響復(fù)制的保真度。 ArchaeMaxx 因子通過消除 dUTP 毒化作用提高產(chǎn)物的產(chǎn)量,dUTP 毒化作用通過 dCTP 脫氨作用在 PCR 期間積累 dUTP 引起。如果 DNA 中摻入了 dU,就會抑制 Pfu 以及 ArchaeMaxx 因子作為 dUTP 酶的作用,將有毒的 dUTP 轉(zhuǎn)化為無害的 dUMP 和無機焦磷酸鹽。PfuTurbo DNA 聚合酶與其它校正酶相比錯誤率更低,是 Taq DNA 聚合酶的 1/6。

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PicoMaxx 高保真 PCR 系統(tǒng)可檢測復(fù)雜 DNA 背景下的低拷貝數(shù)靶標,可擴增困難體系且產(chǎn)生的非特異性擴增極少,并且可與在熱循環(huán)之前需要在室溫下長時間孵育的 PCR 應(yīng)用配合使用。它具有抵抗 PCR 抑制劑影響的穩(wěn)定性,無需大量純化并且無后續(xù) DNA 損失。 該系統(tǒng)由抗體組成,可在循環(huán)開始之前抑制聚合酶活性,有助于實現(xiàn)高特異性并減少背景。該配方是高通量、多靶標擴增實驗的理想選擇。ArchaeMaxx 的優(yōu)勢在于通過消除 dUTP 毒化作用提高產(chǎn)物的產(chǎn)量,dUTP 毒化作用通過 dCTP 脫氨作用在 PCR 期間積累 dUTP 引起。如果 DNA 中摻入了 dU,就會抑制酶以及 ArchaeMaxx 因子作為 dUTP 酶的作用,將有毒的 dUTP 轉(zhuǎn)化為無害的 dUMP 和無機焦磷酸鹽。PicoMaxx 在長達 10 Kb 的一系列模板上可靠地實現(xiàn) PCR 產(chǎn)物高產(chǎn)率。

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Herculase II Fusion DNA 聚合酶實現(xiàn)優(yōu)異產(chǎn)率,延伸時間短達 15 秒/kb,即使基因組 DNA 靶標長達 23 kb 亦是如此。Herculase II 克服 PCR 挑戰(zhàn),成功擴增所有復(fù)雜度的靶標。輕松擴增低豐度靶標、高 GC 含量靶標和其他棘手靶標,產(chǎn)率優(yōu)異。

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準確度對下游應(yīng)用(如克隆、蛋白質(zhì)結(jié)晶研究和測序)至關(guān)重要時,PfuUltra II Fusion HS DNA 聚合酶就是高保真 PCR 的業(yè)界標準。PfuUltra II 的特色在于:基因工程化的 Pfu DNA 聚合酶突變體、ArchaeMaxx 聚合酶增強因子、融合技術(shù)和熱啟動配方。

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PfuUltra 高保真 DNA 聚合酶 AD 特色在于一種新配方的緩沖系統(tǒng)、更高的經(jīng)濟性、性能與原始 PfuUltra 熱啟動 DNA 聚合酶相當。PfuUltra 熱啟動 DNA 聚合酶 AD 由 Pfu DNA 聚合酶的基因工程突變體制成,可對長達 19 kb 的復(fù)雜基因組長靶標進行穩(wěn)定、高保真的擴增。熱啟動性能允許室溫 PCR 組裝,背景低,并可提高檢測靈敏度。它不僅準確度高,還包含我們獨家的 ArchaeMaxx 增強因子,具有尿嘧啶抗性,可提供穩(wěn)定的 PCR 產(chǎn)量、高靈敏度和出色的目標片段擴增能力。

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